Mario Barth machte eine Ausbildung zum Telekommunikationsanlagentechniker, bevor er begann, Schauspielunterricht zu nehmen. Er besuchte Comedy-Workshops und hatte zunächst einige kurze Auftritte in den Sendungen NightWash und Quatsch Comedy Club, bei denen er Bühnenerfahrungen sammelte. 2001 brachte er seine erste Bühnenshow "Männer sind Schweine, Frauen aber auch!" raus, mit der er auf Tour ging. Barth war zwischenzeitlich immer mal wieder in der Comedysendung Schillerstraße als Gast neben Cordula Stratmann zu sehen und wirkte in der Spielshow "Typisch Frau - Typisch Mann" mit. 2005 erschien die Live-DVD zu seinem Programm "Männer sind Schweine, Frauen aber auch!", die während einer Show im Tempodrom in Berlin aufgezeichnet wurde und den dritten Platz der deutschen Album-Charts erreichte. 2006 stand Mario Bart mit seinem zweiten Programm "Männer sind primitiv, aber glücklich!" auf der Bühne. Er erhielt dafür im Oktober 2006 den Deutschen Comedypreis in der Kategorie "Beste Live-Comedy". Es folgten weitere Fernsehformate und 2009 schließlich Barths erster Kinofilm unter dem Titel "Männersache", bei dem er das Drehbuch mitschrieb, Co-Regie führte und eine der Hauptrollen spielte. Am 12. Juli 2008 trat Mario Barth vor rund 70.000 Zuschauern im Olympiastadion Berlin auf und erreichte damit einen neuen Weltrekord als "Live-Comedian mit den meisten Zuschauern". 2009 folgte Barths drittes Bühnenprogramm "Männer sind peinlich, Frauen manchmal auch!", mit dem er 2001 auf Stadiontour ging, die mit einem erneuten Auftritt im Olympiastadion in Berlin endete.
2012 und 2013 startete Mario Barth sein viertes Comedyprogramm "Männer sind schuld, sagen die Frauen", durch das er den Begriff "Brüllkäfer" prägte, der seitdem häufig mit seiner Person in Verbindung gebracht und in verschiedenen Formen vermarktet wird. Der Komiker moderiert verschiedene Fernsehformate, darunter "Willkommen bei Mario Barth" und "Mario Barth deckt auf". Sein 2015 gestartetes Bühnenprogramm "Männer sind bekloppt, aber sexy!" erschien bereits als Live-Album.
Tickets für die aktuelle Tour "Männer sind bekloppt, aber sexy!" sowie Fanartikel zu anderen Bühnenprogrammen sind über die offizielle Website erhältlich, darunter Kaffeebecher, T-Shirts und Schlüsselanhänger mit Aufschriften wie "Brüllkäfer", "Du hast Recht, ich hab meine Ruhe" oder "Männer sind bekloppt, aber sexy!".